血清使用需要注意的問題

（一）被誤判為污染的“小黑點"

經(jīng)過熱處理的血清，往往沉淀物會增多，而這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像是污染物，常常會讓研究者誤以為血清遭到污染。然而，把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物進一步增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

我們的經(jīng)驗是拿到鏡下去觀察是否為細菌狀或真菌狀形態(tài)。還有就是做無菌培養(yǎng)，取一點血清在培養(yǎng)皿中，在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)幾天，觀察沉淀物是否有變化。一般情況下，這些沉淀物并不會影響血清的正常使用，Lab里往往用0.22μM的濾膜過濾一下就繼續(xù)使用了。

（二）解凍血清

解凍血清時，請遵循推薦的分步解凍方法（-20℃→4℃→室溫）。實驗表明，如果血清解凍溫度過高（如-20℃→37℃），很容易產(chǎn)生沉淀。解凍血清時，請隨時搖勻，使溫度和成分均勻，減少沉淀的發(fā)生。請不要長時間將血清放置在37℃環(huán)境中，如果放置時間過長，血清會變得混濁，血清中的許多不穩(wěn)定成分會受到破壞，從而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活很容易引起沉淀物的增加，我們認為這一步是不必要的。如需對血清進行熱滅活，請遵循56℃、30min原則，隨時搖勻。如果溫度過高、時間過長或搖晃不均勻，沉淀物就會增加。

血清中出現(xiàn)沉淀物的原因有很多，但最常見的是血清中脂蛋白的變性，解凍后血清中還會存在纖維蛋白（形成凝塊的蛋白質(zhì)之一），這也是產(chǎn)生沉淀物的主要原因之一。然而，這些絮狀沉淀物雖然并不影響血清本身的質(zhì)量，但有可能會被誤判為污染物。如果要去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝在無菌離心管中，以1200rpm的速度離心，然后將上清液加入培養(yǎng)基中進行過濾。

（三）保存血清

避免血清出現(xiàn)非污染性沉淀物的最好方法就是減少血清反復(fù)凍融的次數(shù)，所以血清少量分裝凍存是一個好方法。建議血清保存在-20～-5℃之間。如果以4℃保存，不要超過一個月。如果一次不能用完一瓶，建議將血清分裝到無菌離心管中，然后再凍存。

中文名 英文名稱 貨號 規(guī)格

WinSera® 優(yōu)級胎牛血清 Fetal Bovine Serum FBS500-WS-002 500ml

WinSera® 特級胎牛血清 Fetal Bovine Serum FBS500-WP-002 500ml

WinSera®干細胞專用胎牛血清  Stem cells Qualified FBS500-WE-002(ES) 500ml

WinSera® 無外泌體血清  Exosome-depleted FBS FBS050-EXO 50ml

WinSera® AB血清 Human Serum AB HU050-S-011 100ml

WinSera®熱滅活胎牛血清  Heat Inactivated FBS FBS500-WH-002 500ml

WinSera®碳吸附胎牛血清  Dextran Stripped FBS FBS500-WCS-002 500ml

WinSera®透析胎牛血清  Fetal Bovine Serum, Dialyzed FBS500-WDF-002 500ml

WinSera®超低IGg胎牛血清  Low IgG FBS FBS500-WLG-002 500ml

WinSera®新生牛血清 NewbornCalfSerum NCS500-W-002 500ml

產(chǎn)品名稱：優(yōu)級胎牛血清

品牌：WinSera

貨號：FBS500-WS-002

規(guī)格：500ml

適用范圍及應(yīng)用領(lǐng)域

1、疫苗的研發(fā)生產(chǎn):人用疫苗：如冠疫苗、乙肝、甲肝、狂犬病疫苗、乙腦、人用出血熱等

獸用疫苗：豬瘟疫苗、禽感疫苗、獸用狂犬病疫苗等

2、生物醫(yī)藥及細胞培養(yǎng)領(lǐng)域:細胞培養(yǎng)；

抗原抗體的研發(fā)生產(chǎn)等；

為細胞制備提供的環(huán)境及增殖營養(yǎng)；

3、科研領(lǐng)域:高校科研

合同研究組織（科研外包CRO模式）醫(yī)院科研及檢驗用血清

診斷試劑的研發(fā)及生產(chǎn)

FBS500-WS-002胎牛血清培養(yǎng)細胞種類

1、常用細胞：VERA、293、293T、SF9、CHO細胞

2、神經(jīng)細胞：PC12、SH-SY5Y

3、原代細胞：牛/豬睪丸原代細胞、原代 腫瘤細胞、大/小鼠原代神經(jīng)細胞、原代腫瘤細胞

4、腫瘤細胞:HELA、HEPG2、A549二倍體細胞:MRC-5、KMB-17、2BS、SV-1

5、免疫細胞培養(yǎng)T細胞、B細胞、NK細胞、DC細胞干細胞培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞、胚胎干細胞、誘導(dǎo)多能干細胞單抗制備B細胞、骨髓瘤(SP0、SP2)、融合細胞(雜交瘤細胞等)

血清沉淀是污染嗎？

無論是較大的絮狀纖維蛋白還是小黑點樣的磷酸鈣，都容易被誤認為是細菌污染，但其實血清沉淀并不是污染。由于在37℃的溫度下培養(yǎng)，會加劇纖維蛋白的析出和磷酸鈣顆粒產(chǎn)生，可采用空培方式驗證污染，血清按所需比例加入無菌培養(yǎng)基中（不加雙抗），放培養(yǎng)箱中過夜，觀察空培外觀，若為澄清，則血清無污染。還可以通過將血清接種在細菌培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，觀察是否存在細菌增殖，并且進行革蘭氏染色，用油鏡觀察直接判斷是否為微生物污染。

血清沉淀會影響細胞生長嗎？

血清出現(xiàn)沉淀是血清的正常特性，各品牌的血清均有沉淀的出現(xiàn)，過于澄清的血清并不代表更高的品質(zhì)，也可能是在加工過程中提前進行“預(yù)老化"，即反復(fù)凍融盡可能的去除纖維蛋白原的結(jié)果。

血清沉淀的多少與血清的使用效果沒有必然關(guān)系，血清沉淀并不會影響細胞的正常生長。